全部
期刊
文献
标题
作者
单位
摘要
关键词
栏目
基金
文献检索
包含全部检索词
包含精确检索词
包含至少一个检索词
作者
出版物
发表时间
-
找到5条结果
第1/1页
确定
语种
  • 更多...
年份
 至 
  • 更多...
学科分类
中文
|
英文
  • 更多...
  • 更多...
关键词
  • 更多...
刊名
  • 更多...
作者
  • 更多...
   已选文献: 0 清除
题名 作者 刊名 栏目 年/期 阅读量 被引 获取
骨肉瘤伴肺转移患者应用阿帕替尼联合常规化疗和单纯常规化疗的临床疗效和药物安全性观察 王雅灵 涂志全 林峰 贵州医药 临床研究 2022年08期 284 0
整合素连接激酶基因敲除骨肉瘤细胞系的建立及其对上皮-间质转化的影响 赖永洁 由万宁 金炼驰 金明哲 贵州医药 论著 2023年03期 241 0
围术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响 王蕊 段显亮 中国保健营养 立项课题 2021年07期 564 0
全程化康复护理在治疗骨肉瘤患者中的应用 王蕊 段显亮 中国保健营养 立项课题 2021年06期 564 0
穿心莲内酯对人骨肉瘤细胞的作用及机制 邓必勇 邓必祥 中国保健营养 立项课题 2021年01期 715 0
阅读量:284
下载量:0
被引数:0
摘要:目的 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建人整合素连接激酶ILK基因敲除的人骨肉瘤U2OS细胞系,探讨ILK敲除对骨肉瘤细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法 首先在人ILK基因的第2,4,6外显子区域选取序列,分别设计3组靶向ILK的sgRNA,退火后与酶切lentiCRISPRv2慢病毒质粒连接,构建含有sgRNA的重组质粒,重组载体与病毒包装质粒共转染293T细胞后获得慢病毒颗粒;将病毒颗粒感染U2OS细胞,经嘌呤霉素筛选及有限稀释法获得单克隆细胞株,通过测序、qRT-PCR及Western blot鉴定ILK基因稳定敲除细胞系,并进一步通过Western blot检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、Snail1、Snail2、Twist等EMT相关标记分子以及Akt的磷酸化水平。结果 构建了3组lentiCRISPRv2-ILK-sgRNA敲除质粒,经慢病毒感染U2OS细胞后及单细胞克隆株的筛选鉴定后得到了一株含有ILK等位基因突变的细胞,Western blot证实ILK-/-细胞中ILK蛋白表达缺失;相比野生型,ILK-/-细胞中N-钙黏蛋白、Snail1、Snail2及Twist蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而E-钙黏蛋白表达则显著升高(P<0.05);与野生型细胞相比,ILK-/-细胞Akt通路的磷酸化水平显著降低(P<0.05),而经TGF-β1处理后,相比野生型细胞,ILK-/-细胞中Akt激活水平亦显著下降(P<0.01)。结论 成功构建ILK-/-U2OS细胞系,敲除ILK可能通过下调Akt信号通路抑制U2OS细胞的EMT进程。
阅读量:241
下载量:0
被引数:0
   已选文献: 0 清除
导出/参考文献 (0

PDF在线阅读

价格:0.00

Copyright © 2021-2024 全科互知 | 赣ICP备2021006197号-4 | 新出网证(赣)字20417号
赣公网安备 36012102000372号 | 赣B2-20210313 | 技术支持:道然科技

sasa 互知学术
sasa 全科互知